Kit per analisi agro-alimentari e ambientali

Test immunoenzimatici lateral flow

I test lateral flow si basano sull'interazione tra un anticorpo specifico per la molecola di interesse e la molecola stessa, rilevando la reazione con un enzima che produce un segnale visibile. la formazione di bande colorate indica la positività o negatività del test.

Si tratta di un test rapido a lettura visiva.

La procedura di test è molto semplice e in generale prevede tre fasi:

• estrazione della proteina, ottenuta mescolando il campione con la soluzione di estrazione
• diluizione, da cui si ottiene il campione da testare sul test rapido
• lettura del risultato che si presenta con la comparsa di determinate bande sul test rapido

Questi test offrono risultati rapidi per la rilevazione qualitativa di contaminanti, allergeni, proteine, e sono molto utilizzati nei test di screening o in situ.

Test cromogenici

I test colorimetrici per la rilevazione e la conta selettiva dei microrganismi misurano l’attività catalitica degli enzimi ossidoreduttasici del metabolismo primario, permettendo di stabilire una corrispondenza certa tra l’attività enzimatica misurata e la carica microbica presente nel campione in esame. La procedura analitica è basata sulla rilevazione colorimetrica, attraverso indicatori redox, del cambiamento dello stato ossidoriduttivo del mezzo di reazione, dovuto all’azione degli enzimi coinvolti nei processi di respirazione e fermentazione.

I test per la rilevazione di residui proteici sono indipendenti dall'ATP. I residui proteici prelevati con il tampone reagiscono con l'indicatore di colore presente sul tampone stesso. Questa interazione induce una diminuzione del pH che porta a una rapida reazione colorimetrica con cambio di colore. In base all'intensità del cambiamento di colore, è possibile determinare il livello di contaminazione in modo orientativo.

Si tratta di test rapidi a lettura visiva.

Test di bioluminescenza

Il test di bioluminescenza con bioluminometro è un metodo rapido ed efficace per verificare l'igiene delle superfici, rilevando la presenza di ATP (adenosina trifosfato), una molecola presente in tutte le cellule viventi, inclusi batteri e altri microrganismi. Il test utilizza tamponi specifici che, una volta a contatto con la superficie, vengono inseriti nel bioluminometro. Lo strumento misura la luce emessa durante la reazione di bioluminescenza tra l'ATP e il reagente luciferina/luciferasi, fornendo un valore che indica il livello di contaminazione.

Il test è eseguibile in situ, molto veloce e richiede una minima attrezzatura e training.

Test qPCR

La PCR è un metodo utilizzato per amplificare una specifica sequenza di DNA in una reazione che contiene, tra gli altri componenti, una DNA polimerasi termostabile, nucleotidi e primer complementari alla sequenza bersaglio.

La metodica prevede alcuni passaggi quali:

• denaturazione, allineamento ed estensone, la molecola di DNA si denatura quando questa soluzione viene riscaldata, separandosi in due filamenti. Raffreddandosi, i primer si legano alle sequenze bersaglio nei filamenti di DNA separati e la DNA polimerasi sintetizza un nuovo filamento estendendo i primer con nucleotidi, creando una copia della sequenza di DNA (ampliconi)
• amplificazione, ripetuto, questo ciclo di denaturazione, ricombinazione ed estensione aumenta esponenzialmente il numero di ampliconi bersaglio
• misurazione, nella PCR in tempo reale, il segnale viene misurato a ogni ciclo, utilizzando nella maggior parte dei casi sonde fluorescenti specifiche. La fluorescenza viene misurata da un rivelatore e il software associato traccia l'intensità della fluorescenza in funzione del numero di cicli, consentendo di determinare la presenza o l'assenza dell'organismo bersaglio.

Test immunoenzimatici ELISA

Si basano sull'interazione tra un anticorpo specifico per la molecola di interesse e la molecola stessa, rilevando la reazione con un enzima che produce un segnale rilevabile con un lettore ottico.

Test ampiamente utilizzato per la determinazione quantitativa e qualitativa di contaminanti, allergeni, proteine.

La metodica prevede alcuni passaggi quali:

• estrazione della molecola di interesse
• reazione, legame tra l'anticorpo specifico e la molecola di interesse, se presente
• coniugazione, legame tra l'anticorpo già legato alla molecola e un secondo anticorpo, legato a un enzima
• rivelazione, cambiamento di colore di un substrato che reagisce con l'enzima
• quantificazione della molecola proporzionalmente al segnale emesso