ANALISI MICROBIOLOGICHE NELL'INDUSTRIA FARMACEUTICA

Questo focus regolatorio fornisce i dettagli delle procedure per le analisi microbiologiche, dei TERRENI DI COLTURA IN POLVERE consigliati e delle metodiche di test.

La Farmacopea è lo strumento ufficiale che stabilisce gli standard di qualità per i principi attivi, le formulazioni e i processi di produzione dei farmaci.

Questa normativa prevede anche l’analisi microbiologica dei prodotti finiti, delle materie prime, dell’acqua, dell’aria, delle attrezzature e dei materiali di confezionamento, essenziale per ridurre al minimo la presenza di contaminazioni.

Un farmaco è considerato contaminato quando supera i limiti consentiti di microrganismi patogeni o indesiderati, in grado di compromettere la sua efficacia, produrre sostanze tossiche o causare alterazioni fisiche o chimiche.

L’analisi microbiologica riveste un ruolo cruciale nel garantire la sicurezza del prodotto farmaceutico.

Microbiological water testing - Terreni secondo Ph. Eur. 9.0

L’acqua è una delle sostanze più utilizzate nell’industria farmaceutica, sia come ingrediente nella formulazione dei farmaci, sia per il lavaggio di attrezzature e impianti. Il controllo microbiologico dell’acqua è essenziale in tutte le fasi del processo, a partire dall’ingresso nell’impianto fino alla purificazione, conservazione e distribuzione.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Agar R2A, Trypticasein Soy Agar (TSA).

Sterility testing - Terreni secondo Ph. Eur. 2.6.1

Il test di sterilità ha lo scopo di verificare l’assenza di contaminazione microbica nei prodotti sterilizzati o preparati in condizioni asettiche. Un risultato conforme attesta che nel campione analizzato non sono presenti microrganismi vitali. Per assicurare l'affidabilità del test, è fondamentale che anche l’ambiente di esecuzione sia adeguatamente controllato e sottoposto a monitoraggi regolari. L’esecuzione del test prevede inoltre una prova di promozione della crescita oltre alla verifica di idoneità del metodo. La scelta del terreno di coltura varia in base al tipo di microrganismo target.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI:

• Batteri anaerobi e aerobi: Thioglycolate Liquid Medium.
• Batteri aerobi e funghi e lieviti: Trypticasein Soy Broth (TSB). 

Non-sterile product testing - Terreni secondo Ph. Eur. 2.6.12

Terreni di coltura per conta mesofila totale

I test descritti in questa sezione consentono la quantificazione dei batteri mesofili aerobici, dei microrganismi aerobi vitali (TAMC - Total Aerobic Microbial Count) e del totale combinato di lieviti e muffe (TYMC - Total Yeast and Mold Count), in grado di crescere in condizioni aerobiche. Il risultato viene espresso in numero di unità formanti colonia (CFU) per grammo o millilitro di prodotto. Per il raggiungimento di questo obiettivo possono essere impiegati diversi metodi, tra cui: la filtrazione su membrana, il metodo della conta su piastra (sia Pour Plate che Surface Spread Method), e il metodo del numero più probabile (Most Likely Number Method - TAMPC).

Filtrazione su membrana

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Buffered Peptone Water, Trypticasein Soy Agar (TSA), Sabouraud Dextrose Agar (SDA).

Metodo di conta su piastra

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Buffered Peptone Water, Trypticasein Soy Agar (TSA), Sabouraud Dextrose Agar (SDA).

Most Likely Number Method

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Buffered Peptone Water, Trypticasein Soy Broth (TSB), Trypticasein Soy Agar (TSA).

Terreni di coltura per Escherichia coli

L’Escherichia coli è un batterio Gram-negativo considerato un indicatore di contaminazione fecale. La sua rilevazione nei medicinali, in particolare in quelli a somministrazione orale o di origine naturale, indica condizioni igieniche inadeguate durante la produzione o la manipolazione. La Farmacopea Europea ne richiede la ricerca e, se necessario, la quantificazione.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Buffered Peptone Water, Trypticasein Soy Broth (TSB), MacConkey Broth, Agar MacConkey.

Terreni di coltura per batteri gram negativi bile-tolerant

I batteri Gram-negativi, come Escherichia, Pseudomonas e Aeromonas, presentano una struttura cellulare che li rende particolarmente resistenti a numerosi farmaci e agenti chimici, consentendo loro di sopravvivere anche in ambienti ostili. La ricerca di questi microrganismi può essere eseguita sia un test qualitativo che un quantitativo.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Trypticasein Soy Broth (TSB), Mossel EE Broth, Violet Red Bile Agar with Glucose Plate (VRBG).

Terreni di coltura per Salmonella

La Salmonella è un batterio Gram-negativo molto diffuso che può causare infezioni gastrointestinali o sistemiche. Presente nell’intestino di animali e umani, si trova facilmente in materie prime naturali, soprattutto di origine animale, rendendo fondamentale ila sua rilevazione in farmaci e cosmetici.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Trypticasein Soy Broth (TSB), Rappaport Vassiliadis Broth, XLD Agar.

Terreni di coltura per Staphylococcus aureus

Lo Staphylococcus è un batterio Gram-positivo normalmente presente sulla pelle e nelle mucose umane, ma può diventare patogeno opportunista, causando infezioni come polmoniti, osteomieliti ed endocarditi. La presenza di Staphylococcus aureus in materie prime o prodotti farmaceutici/cosmetici indica una contaminazione di origine umana ed è quindi oggetto di vertfica.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Trypticasein Soy Broth (TSB) o Buffered Peptone Water, Mannitol Salt Agar (MSA).

Terreni di coltura per Pseudomonas aeruginosa

Il Pseudomonas aeruginosa è un batterio Gram-negativo, altamente adattabile e dotato di numerosi fattori di virulenza, capace di causare infezioni che variano da forme lievi a condizioni gravi come sepsi o endocarditi. Può contaminare anche cosmetici liquidi e creme, oltre a colonizzare i sistemi di purificazione dell’acqua attraverso la formazione di biofilm. La sua elevata resistenza agli antibiotici rappresenta una delle principali sfide sanitarie a livello mondiale, per questo è essenziale controllarne la presenza con analisi microbiologiche.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Buffered Peptone Water, Trypticasein Soy Broth (TSB), Cetrimide Agar.

Terreni di coltura pe Clostridium

I Clostridia sono batteri anaerobi Gram-positivi, ampiamente diffusi in natura, soprattutto nel suolo e nel tratto intestinale di animali e dell’uomo. Possono causare infezioni endogene ed esogene in vari tessuti, come ascessi, coliti, endocarditi e infezioni orali. La presenza di Clostridia è comune in materie prime naturali come polveri, amidi, erbe medicinali e prodotti fitoterapici, motivo per cui è importante monitorarli nei controlli microbiologici.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI Trypticasein Soy Broth (TSB), Buffered Peptone Water, Reinforced Clostridial Medium, Columbia Agar.

Terreni di coltura per Candida

I Candida sono lieviti unicellulari comunemente presenti nell’uomo, soprattutto nella cavità orale, tratto gastrointestinale e area vaginale. Pur avendo un ruolo importante nella fermentazione di alcuni zuccheri, possono agire come patogeni opportunisti, causando infezioni. I prodotti più a rischio di contaminazione sono soluzioni oftalmiche, unguenti, supposte, cosmetici, saponi e polveri, specialmente quelli ricchi di carboidrati e acidi grassi.

TERRENI DI COLTURA NECESSARI: Trypticasein Soy Broth (TSB), Buffered Peptone Water, Sabouraud Dextrose Broth, Sabouraud Dextrose Agar (SDA).